根據不同的實驗需求和安全級別要求，二級生物安全柜可分為多種類型，如II級A1、A2、B1、B2型等。其中，A1型和A2型適合處理少量揮發性有毒化學品和痕量放射性核素的實驗，但不能用于大量此類物質的操作；B1型可用于處理少量揮發性有毒化學品和痕量放射性核素的實驗，但如果涉及大量此類物質的操作則需選擇B2型；B2型適用于處理以揮發性有毒化學品和放射性核素為輔助劑的微生物實驗，且能更好地應對可能出現的危險情況。
二級生物安全柜的使用注意事項：
1.個體防護：
在使用生物安全柜時應穿著個體防護服并戴手套防止被污染。在進行安全水平操作時，可穿著普通實驗服。手套應套在實驗服袖口外面。有些操作可能還需要戴口罩和護目鏡。
2.物品放置：
避免將物品放入生物安全柜內過夜(除非制造商有此規定)。
所有物品應盡可能地放在工作臺后部靠近工作臺邊緣的位置，并使其在操作中不會阻擋后部格柵。
可產生氣溶膠的設備(如：混勻器、離心機等)應靠近安全柜的后部放置。有生物危害性的廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤子等體積較大的物品，應該放在安全柜內的某一側。
潔凈的物品應放置在距離產生氣溶膠器皿至少15cm外，降低交叉污染的可能性。
容易受紫外線損傷的實驗樣本可以在紫外線殺菌后的實驗之前放入。
不要在工作區內排放過多的物品。
3.操作規范：
手和雙臂伸入到生物安全柜中等待大約1min,以便安全柜調整完畢并且讓里面的空氣“掃過”手和雙臂的表面以后，才可以開始對物品進行處理。
減少手臂的移動，移動時要緩慢，防止干擾柜內氣流。在移動雙臂進出安全柜時，需要小心維持前面開口處氣流的完整性，雙臂應該與工作區開口垂直地緩慢進出前面的開口。
在工作臺面上的實驗操作應該按照從清潔區到污染區的方向進行，所有操作在工作臺面的中后部進行。
一旦實驗過程中產生溢灑物，用消毒紙巾置于其表面吸附清理。
4.使用后處理：
系緊用過的生物廢物袋。
對安全柜內壁、后壁、工作臺面和前窗內側進行清潔和消毒處理。
由于剩余的培養基可能會使微生物生長繁殖，因此在實驗結束時，包括儀器設備在內的所有物品都應清除表面污染，并移出安全柜。
從安全柜內移出手臂之前，一定要進行表面消毒處理，然后垂直于工作區開口緩慢地移出。
在每次使用后，要清除生物安全柜內表面的污染。工作臺面和內壁要用消毒劑進行擦拭，所用的消毒劑要能夠殺死安全柜里的任何微生物。在每天實驗結束時，應擦拭生物安全柜的工作臺面、四周以及玻璃的內外側等部位來清除表面的污染。在對目標生物體有效時，可以采用漂白劑溶液或70%酒精來消毒。在使用如漂白劑等腐蝕性消毒劑后，還必須用無菌水再次進行擦拭。
關閉前操作窗口并開啟紫外燈。
5.溢灑處理：
處理溢灑物時不要將頭伸入安全柜內，也不要將臉直接面對前操作口，而應處于前視面板的后方。選擇消毒滅菌劑時需要考慮其對生物安全柜的腐蝕性。
如果溢灑的量不足1ml時，可直接用消毒滅菌劑浸濕的紙巾(或其他材料)擦拭。
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